Nijs

Javascript is op it stuit útskeakele yn jo blêder.Guon funksjes fan dizze webside sille net wurkje as JavaScript is útskeakele.
Registrearje mei jo spesifike details en it spesifike medisyn fan belang, en wy sille oerienkomme mei de ynformaasje dy't jo leverje mei artikels yn ús wiidweidige database en jo fuortendaliks in PDF-kopy e-postearje.
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, Department of Infectious Diseases, Suzhou University First Affiliated Hospital, Suzhou City, Jiangsu Province, 215000 Tel.tumors fan it spijsvertering systeem mei in 5-jierrige totale oerlibjen fan 14,1%.In protte pasjinten mei HCC wurde diagnostearre op in avansearre stadium, dus iere screening is essensjeel om de mortaliteit fan HCC te ferminderjen.Neist algemien brûkte deteksje-yndikatoaren lykas serum alfa-fetoprotein (AFP), lens lectin-reaktyf alfa-fetoprotein (AFP-L3), en abnormaal protrombin (vitamine K-deficiency-induzearre protein II, PIVKA-II), floeistofbiopsytechniken It is oantoand dat it fan diagnostyske wearde is yn 'e deteksje fan HCC.Yn ferliking mei invasive prosedueres kin floeistofbiopsy sirkulearjende maligne metaboliten detectearje.Fluidbiopsytechniken detektearje sirkulearjende tumorsellen, sirkulearjend tumor DNA, sirkulearjend RNA, en exosomen en wurde brûkt foar iere screening, diagnoaze en prognostyske evaluaasje fan HCC.Dit artikel besjocht de molekulêre biology en tapassing fan ferskate floeibere biopsie-techniken om belofte biomarkers te isolearjen dy't libbensfetbere opsjes kinne wêze foar iere beoardieling fan HCC om iere screening fan hege-risiko HCC-groepen te ferbetterjen.Keywords: floeistofbiopsytechnyk, hepatocellulêre karsinoom, groep mei hege risiko.
Hepatocellular carcinoma (HCC) is in mienskiplike maligne tumor fan it spijsvertering traktaat, ranglist sechsde ûnder nije gefallen fan maligne tumors yn sawol manlju as froulju.1 Wrâldwiid is leverkanker de tredde liedende oarsaak fan kankerdea nei long- en kolorektale kanker, goed foar 8,3% fan kanker-relatearre deaden fan alle maligne neoplasmen.1 De prognoaze fan HCC is nau besibbe oan it poadium by diagnoaze.De wichtichste redenen foar min oerlibjen yn HCC binne intrahepatyske metastasen, portale veneuze tumor trombi, en fiere metastasen dy't reseksje útslút, en in protte fan dizze skaaimerken binne al oanwêzich yn pasjinten op it momint fan diagnoaze.
Op grûn fan diagnoaze- en behannelingrjochtlinen binne de wichtichste risikofaktoaren foar it ûntwikkeljen fan HCC cirrhosis fan 'e lever, chronike hepatitis B-firus (HBV) of hepatitis C-firus (HCV)-ynfeksje, alkoholyske fatty-leversykte, en non-alcoholic fatty lever disease (NAFLD) ).2 Dêrnjonken omfetsje risikofaktoaren foar HCC aflatoxine-fersmoarge fiedingsyntak, schistosomiasis, oare oarsaken fan cirrhosis, in famyljeskiednis fan leverkanker, diabetes, obesitas, smoken, en drug-induzearre leverblessuere.35- en 45-jierrige groepen mei hege risiko's moatte regelmjittich medyske kontrôles hawwe.Iere screening is in wichtige betide behannelingstrategy om it algemiene oerlibjen fan pasjinten mei HCC te ferbetterjen.
Biomarkers lykas AFP, AFP-L3 en PIVKA-II wurde oanrikkemandearre foar iere screening fan HCC3,4.Flüssige biopsietechniken hawwe kânsrike resultaten toand yn iere diagnoaze en behannelingevaluaasje.5,6 Wichtige foarútgong is makke yn HCC floeibere biopsie, dy't in hegere gefoelichheid en spesifisiteit kin hawwe dan gewoan brûkte serummarkers lykas AFP (tabel 1).
AFP is in breed brûkte biomarker yn HCC en is op it stuit de meast detaillearre biomarker dy't breed brûkt wurdt foar iere screening, diagnoaze en evaluaasje fan 'e sykte.In oanhâldend ferhege AFP-nivo wurdt beskôge as in risikofaktor foar de foarútgong fan HCC.7,8 De deteksjefrekwinsje fan lyts hepatocellular carcinoma (sHCC) nimt ta mei de ûntwikkeling fan ultrasound en komputearre tomografy, en AFP is fûn benammen ûngefoelich te wêzen foar de deteksje fan hHCC yn klinyske praktyk.Neffens in retrospektyf multicenter-stúdzje9, waard AFP-posityf fûn yn 46% (616/1338) fan HCC-gefallen en 23.4% (150/641) fan sHCC-gefallen.Derneist wurde AFP-nivo's ferhege yn pasjinten mei chronike leversykte en cirrhosis.10 Sa hat AFP in beheind screening-effekt foar sHCC.11 Neffens de Asia-Pacific Clinical Practice Guidelines for Hepatocellular Carcinoma, wurdt it gebrûk fan AFP net oanrikkemandearre.12 Klinysk bewiis suggerearret dat PIVKA-II superieur is oan AFP yn 'e behanneling fan HCC en dat de kombinaasje fan PIVKA-II en AFP hat in hegere diagnostyske wearde yn HCC.13 Yn ferliking mei weefselbiopsy detektearret floeistofbiopsy primêr tumor-assosjearre metaboliten yn lichemsfloeistoffen (bloed, speeksel, pleurale floeistof, cerebrospinale floeistof, of urine) en is minder invasyf foar weefsels.14 Derneist kinne floeibere biopsies maligne eigenskippen reflektearje dy't net oanwêzich binne yn primêr tumorweefsel.15 Flüssige biopsieën wurde noch net yn klinyske praktyk hifke foar alle soarten tumors, mar har diagnostykpotinsjeel yn kanker lûkt de oandacht fan onkologen.16 Fluidbiopsy kin sirkulearjende tumorsellen (CTC's), sirkulearjend tumor DNA (cDNA), sirkulearjend frije RNA (ecRNA), en eksosomen detectearje.Yn dit artikel sille wy de skaaimerken, rol en tapassing fan ferskate floeistofbiopsytechniken besprekke yn iere screening fan hege risiko-HCC-groepen.
Ekstrazellulêre DNA (cfDNA) yn bloedmonsters fan sûne persoanen waard foar it earst beskreaun yn 1948 troch Mandel et al.17 cfDNA is in selfrij DNA-fragmint fan likernôch 160-180 bp yn 'e lingte, dat primêr ûntstiet út lymfozyten en myeloïde sellen.ctDNA is in spesifyk mutant DNA-fragmint frijjûn troch tumorsellen yn it perifeare bloed, dat de genomyske ynformaasje fan tumorsellen fertsjintwurdiget nei bepaalde pathofysiologyske prosessen, ynklusyf nekrose, apoptose en útskieding.It oanpart fan ctDNA yn totaal cfDNA ferskilt breed mei tumortype, en cDNA-fragminten wurde rapportearre om typysk minder dan 167 bp lang te wêzen.18 Underhill's stúdzje liet sjen dat cfDNA-fragminten oer it generaal koarter binne as normaal cfDNA.19 Yn ferliking mei sûne persoanen is de totale lingte fan cfDNA-fragminten yn it bloed fan kankerpasjinten koarter, sadat cfDNA brûkt wurde kin as in yndikator fan iere tumorscreening.Ferriking fan bepaalde subsets fan lingten fan cfDNA-fragminten kin de deteksje fan cDNA ferbetterje dy't ferbûn is mei net-metastatyske solide tumors.Stúdzjes hawwe oantoand dat ctDNA wurdt fûn yn mear as 75% fan avansearre panko's, kolon, blaas, gastrointestinale, lever, eierstok, boarst, melanoma, en holle en nekke kankers.20,21 It bedrach fan ctDNA yn it bloed hinget lykwols ôf fan 'e lokaasje fan' e tumor.22 Yn in stúdzje fan Bettegoud waard fûn dat pasjinten mei kolorektale, boarst-, lever-, long- en prostaatkanker hegere nivo's fan cDNA yn har bloed hawwe as oare kankers.Yn tsjinstelling, yn pasjinten mei mûnlinge kanker, panko's kanker, maag kanker, en glioma, cDNA konsintraasje yn it bloed wie leger.ienentweintich
Om't ctDNA deselde genetyske mutaasjes befettet as primêre tumorsellen, kin cDNA brûkt wurde om heterogene tumor-spesifike mutaasjes en epigenetyske feroaringen te detektearjen, ynklusyf methylaasje, hydroxymethylaasje, single nucleotide fariaasjes, en kopienûmerfariaasjes.trijeentweintich
DNA-methylaasje is ien fan 'e meast foarkommende epigenetyske feroaringen dy't resultearje yn gen-ûnderdrukking.Yn ferliking mei normale sellen binne d'r ferskillen yn it totale nivo fan methylaasje fan it tumorselgenoom, benammen yn 'e methylaasje fan tumor-suppressorgenen, dy't yn in ier stadium ûntdutsen wurde kinne, wat suggerearret dat feroaringen yn DNA-methylaasje in yndikator wêze kinne fan iere deteksje fan tumorigenesis.Tumor-suppressor-genen dy't ferbûn binne mei HCC kinne ynaktiveare wurde troch promotormethylaasje, wêrtroch tumorigenesis stimulearret.24 DNA-methylaasje is in ideale marker foar de iere diagnoaze fan tumors fanwegen syn weefselspesifisiteit, detectability en leeftyd-ûnôfhinklikens.Derneist is DNA-methylaasje faker yn ferliking mei somatyske mutaasjes, om't d'r mear doelregio's en ferskate feroare CpG-siden binne yn elke regio fan it doelgenoom.25 Neist meardere CpG-siden binne in grut oantal unôfhinklike hypermethylearre loci yn ctDNA identifisearre yn DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1, en RGS10.26 Xu et al.Fergeliking fan cfDNA-samples fan 1098 HCC-pasjinten en 835 sûne kontrôles waard fûn dat genen assosjearre mei HCC sterk korrelearje mei de oerienkommende plasma cDNA-methylaasje-hantekeningen.25 Op grûn fan laboratoariumanalyse waard in foarsizzend model ûntwikkele mei 10 methylaasjemarkers mei sensitiviteit en spesifisiteit fan respektivelik 85.7% en 94.3%, en dizze markers wiene tige korrelearre mei tumormassa, tumorstadium en reaksje op behanneling.Dizze resultaten jouwe oan dat it gebrûk fan cDNA-methylaasjemarkers grutte belofte hâldt yn 'e diagnoaze, tafersjoch en prognoaze fan HCC.Yn in methylaasjemodel besteande út trije ôfwikende methylearre genen (APC, COX2, RASSF1A) en ien miRNA (miR203) presintearre troch Lu et al27, wiene de gefoelichheid en spesifisiteit fan model 27 foar diagnoaze fan HBV-assosjearre HCC fergelykber.80%.Derneist koe it model 75% fan net-diagnostisearre HCC-pasjinten ûntdekke mei in AFP-nivo fan 20 ng / ml.It gen foar de Ras-assosjearre domeinfamylje 1A-protein (RASSF1A) is de wichtichste repetitive DNA-sekwinsje yn it minsklik genoom.Araujo et al.konkludearre dat hypermethylaasje fan 'e RASSF1A-promotor in weardefolle biomarker kin wêze foar iere screening fan HCC en in potinsjele molekulêre doel foar epigenetyske terapy.28 Yn ien stúdzje waard serum RASSF1A-promotor hypermethylaasje fûn yn 73.3% fan pasjinten mei HCC.29 Lang ôfwiksele nukleotide elemint 1 (LINE-1) is in oare tige aktive retrotransposysje mediator.Hypomethylaasje fan LINE-1 waard fûn yn it DNA fan 66.7% fan HCC-serummonsters en waard ferbûn mei iere weromkomst en min oerlibjen nei radikale reseksje.29 Hypermethylaasje is in mienskiplik genetysk proses dat in unike rol spilet yn 'e ûntwikkeling fan levercirrhosis en HCC.30 Yn tsjinstelling, hydroxymethylation is in demethylation proses dat induces gen reaktivearring en ekspresje, en de detectie fan it 5-hydroxymethylcytosine (5-hmC) produkt yn dit proses kin brûkt wurde om te identifisearjen in tumor.Methylaasje en hydroxymethylaasje fan cDNA binne assosjearre mei tumorigenesis en kinne bydrage oan it iere screening fan HCC.Yn in stúdzje fan 2554-ûnderwerpen waarden 31 genome-brede 5-hmC's fûn yn cfDNA-samples, en 32-genen waarden identifisearre troch it fergelykjen fan 5-hmC-sekwinsjes yn HCC-pasjinten en hege risiko-groepen lykas dy mei chronike sykten.Diagnostyske modellen fan leversykten.en cirrhosis.Dit model wie superieur oan AFP yn it ûnderskieden fan HCC fan net-tumorweefsel.
Mutaasjes yn kodearjende regio's kinne liede ta transkripsje-abnormaliteiten, wat kinne liede ta feroaringen yn proteïnesekwinsjes en úteinlik kanker.Single nukleotidefarianten binne wichtige genomyske markers foar iere tumorscreening fanwegen har hege weefselbetrouberens en hege tumor- en weefselspesifisiteit.Tal fan HCC-relatearre stúdzjes dy't gebrûk meitsje fan folgjende generaasje sequencing (NGS) foar exome en hiele genome sequencing fan kanker hawwe mienskiplike mutearre sellulêre genen identifisearre lykas TP53 en CTNNB1, lykas ek ferskate ynklusyf ARID1A, MLL, IRF2.De nije genen, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 en JAK1 litte matige mutaasjesifers sjen. Mutant-genfunksje-analyse suggerearret dat feroaringen yn chromatine-remodeling, Wnt / β-catenin en JAK / STAT-sinjaaltransduksje, de P53-selsykluspaad, epigenetyske modifiers, oksidative stresspaden, de PI3K / AKT / MTOR-paad en de RAS / RAF / MAPK kinase paad spylje krúsjale rollen yn HCC onkogenesis.32,33 Yn in stúdzje wêryn tumor-assosjearre mutaasjes waarden ûntdutsen, Huang et al fûn dat de frekwinsje fan tumor-assosjearre mutaasjes ôfhinklik fan ctDNA wie 19.5%, en de specificiteit wie 90% .34 Dêrnjonken wiene pasjinten dy't vaskulêre ynvaazje ûnderfûnen mear kâns op ctDNA-mutaasjes (P=0.041) en koartere werhellingsfrije oerlibjen (P<0.001). Mutant-genfunksje-analyse suggerearret dat feroaringen yn chromatine-remodeling, Wnt / β-catenin en JAK / STAT-sinjaaltransduksje, de P53-selsykluspaad, epigenetyske modifiers, oksidative stresspaden, de PI3K / AKT / MTOR-paad en de RAS / RAF / MAPK kinase paad spylje krúsjale rollen yn HCC onkogenesis.32,33 Yn in stúdzje wêryn tumor-assosjearre mutaasjes waarden ûntdutsen, Huang et al fûn dat de frekwinsje fan tumor-assosjearre mutaasjes ôfhinklik fan ctDNA wie 19.5%, en de specificiteit wie 90% .34 Dêrnjonken wiene pasjinten dy't vaskulêre ynvaazje ûnderfûnen mear kâns op ctDNA-mutaasjes (P=0.041) en koartere werhellingsfrije oerlibjen (P<0.001).Mutant-genfunksje-analyse suggerearret dat feroaringen yn chromatine-remodeling, Wnt / β-catenin en JAK / STAT-sinjalearring, P53-selsykluspaad, epigenetyske modifiers, oksidative stresspaden, PI3K / AKT / MTOR-paad, en RAS / RAF / MAPK kinase-paad spielje in krityske rol yn HCC tumorigenesis.32,33 Yn in stúdzje dy't tumor-assosjearre mutaasjes fûn, Huang et al.fûn dat de frekwinsje fan ctDNA-ôfhinklike tumor-assosjearre mutaasjes 19,5% wie en de spesifisiteit 90%..34 Кроме того, у пациентов с сосудистой инвазией чаще встречались мутации цДНК (P=0,041) инвазией чаще встречались мутации цДНК (P=0,041) of 0,041 и болекя. .34 Dêrnjonken hiene pasjinten mei vaskulêre ynvaazje mear cDNA-mutaasjes (P=0.041) en in koartere syktefrij oerlibjen (P<0.001).Funksjonele analyze fan 'e mutante genen iepenbiere chromatine-remodeling, Wnt / β-catenin en JAK / STAT-sinjalearring, de P53-selsykluspaad, epigenetyske modifiers, de oksidative stresspaad, de PI3K / AKT / MTOR-paad, en de RAS / RAF / MAPK kinase-paad spylje in krityske rol yn onkogenese fan HCC. 32,33 在 一 项 检测 到 肿瘤 中 突变 突变 的 研究 突变 突变 相关 研究 人 肿瘤 相关 相关 相关 为 为 相关 相关 为 为 为 为 为 为 为 9.5%, 特异性 为 90% .34 此外, 经历 血管 侵犯 的 患者 更 有 可能 发生 CTDNA突变（P=0.041）和更短的无复发生存期（P<0.001）. 32.33 在 一 项 检测 到 到 突变 的 的 到 相关 发现 发现 发现 发现 肿瘤 等 为 为 19,5%, 特异性 为 90%. 25 此外 血管 侵犯 的 此外 经历 发生 Ctdna 突变 (p = 0.041) 和 更短的无复发生存期（P<0.001）.32,33 Yn in stúdzje dy't tumor-assosjearre mutaasjes fûn, Huang et al.fûn dat tumor-assosjearre mutaasjes 19,5% ôfhinklik wiene fan cDNA mei in spesifisiteit fan 90% 34. Dêrnjonken wiene pasjinten dy't vaskulêre ynvaazje ûndergien hiene mear kâns om cDNA te ûntwikkeljen.мутация (P = 0,041) en более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). mutaasje (P=0.041) en koarter syktefrij oerlibjen (P<0.001).In oar mienskiplik gen foar HCC-bestjoerder is TP53, dat in mutaasjerate hat fan mear as 30%.Stúdzjes hawwe oantoand dat de frekwinsje fan TP53-mutaasjes yn ctDNA yn bloed en urine farieart fan 5% oant 60%.35 Johan syn stúdzje liet sjen dat it ctDNA-mutaasjespektrum yn lette HCC in ferlykber mutaasjenivo hat as iere HCC, ynklusyf de TERT-promotor (51%), TP53 (32%), CTNNB1 (17%), PTEN (8%), mutaasjes yn AXIN1 ., ARID2, KMT2D en TSC2 (elk 6%).36 It β-catenin (CTNNB1) onkogen spilet in wichtige rol yn 'e Wnt-sinjaalpaad.De transkripsje-koaktivator CTNNB1 kin geneekspresje befoarderje, wat kin liede ta selproliferaasje, remming fan apoptose, en angiogenesis.CTNNB1 kin ek ynteraksje mei TERT om hepatocyte-transformaasje te inducearjen.33 De TERT-promotor wurdt faak mutearre yn guon solide tumors.Feroarings yn TERT, ien fan 'e ierste genetyske feroaringen yn maligne transformaasje fan HCC, kinne liede ta telomerase-reaktivaasje yn cirrhotyske hepatocytes en kinne proliferaasje befoarderje en fergrizing foarkomme.Mutaasjes yn 'e 33-37 TERT-promotor binne rapportearre om te foarkommen yn 59-90% fan pasjinten mei proliferative levernodules en iere HCC en binne ferbûn mei oerlibjen.38
Copy number feroarings (CNA) binne in wichtich subtype fan somatyske mutaasjes.Undersyk hat oantoand dat de wiidferspraat en fokale lêst fan CNA in genomyske hantekening is dy't yn steat is om tumorimmune ynfiltraasje en útsluting te foarsizzen yn guon soarten kanker.39 Aktive ynfiltraasje-sinjalearring, hege cytolytyske aktiviteit, swiere ûntstekking en genetyske markers ferbûn mei anty-presintaasje yn HCC.Analyse fan 'e gegevensarray fan single nucleotide polymorphisms yn 477 ûnderwerpen die bliken in lege lêst op' e CNS.Yn tsjinstelling lieten chromosomaal ynstabile tumors mei in hege wiidweidige CNA-lading tekens fan ymmúnôfwizing en waarden ferbûn mei proliferaasje, DNA-reparaasje en TP53-dysfunksje.Xu et al.liet sjen dat de HCC-groep hegere CNA-skoares hie as de groep mei chronike leversykte.40 Mei it brûken fan folsleine-genome-sekwinsje fan in inkele sel, waarden CNA's betiid fûn yn hepatokarcinogenesis en bliuwe relatyf stabyl tidens tumorprogression.41 Chung et al.fûn dat cfDNA-nivo's signifikant ferhege waarden yn HCC-pasjinten en dat genome-brede CNA's yn cfDNA in wichtige ûnôfhinklike prognostyske marker wiene yn HCC-pasjinten behannele mei sorafenib.42 Pasjinten mei in hegere CNA-lêst wiene mear kâns op sykteprogression en dea as dy mei in legere CNA-lêst.Ollerich et al.fûn dat Copy Number Instability Index (CNI) kin wurde brûkt om CNA te beoardieljen yn cfDNA fan kankerpasjinten.Se merkten op dat pasjinten mei avansearre kanker signifikant hegere CNI-skoares hiene dan in kontrôtgroep, dy't de reaksje fan pasjinten beoardielet op systemyske gemoterapy en immunoterapy.43 Dizze resultaten suggerearje dat CNA's fûn yn floeibere biopsie-eksimplaren kinne tsjinje as prognostyske yndikatoaren yn pasjinten mei avansearre kanker.HCC op 'e eftergrûn fan systemyske terapy.
Op it stuit kinne de metoaden dy't brûkt wurde om ctDNA te ûntdekken, wurde ferdield yn doelrjochte en net-rjochte metoaden.Koartsein, rjochte metoaden lykas digitale polymeraseketenreaksje (dPCR), BEAMing digitale PCR, Amplification Refractory Mutation System-PCR, Capp-Seq en Tam-Seq binne heul gefoelich foar foarôf definieare genen.Off-target metoaden lykas hiele genome sequencing en NGS jouwe in wiidweidich werjefte fan it hiele genomyske lânskip.44 Yn ferliking mei doelpanielen kin de folchoarder fan it hiele genome net allinich puntmutaasjes en ynfoegingen detektearje, mar ek werynrjochtingen en fariaasjes fan kopijnûmers.prognose, en CTC en cfDNA binne goede yndikatoaren dy't brûkt wurde kinne foar dynamyske tafersjoch fan HCC.45 Derneist kin cfDNA-analyze nuttich wêze by it opspoaren fan HCC.Yan et al.toande dat cfDNA yn it plasma fan pasjinten mei HCC signifikant heger wie as yn pasjinten mei leverfibrose en sûne kontrôles.Yn ferliking mei AFP wurdt ferwachte dat ctDNA in bettere screeningmarker sil wêze foar iere HCC.46 Yn in prospective stúdzje fan 47 floeibere biopsies dy't cfDNA en proteïne testen yn in befolkingsbefolking, waarden se oantoand effektyf te wêzen yn it ûnderskieden fan pasjinten mei HCC fan pasjinten sûnder HCC.Yn in follow-up fan 331 echografie normale en AFP-negative pasjinten, de gefoelichheid en spesifisiteit fan cfDNA foar diagnoaze HCC wiene respektivelik 100% en 94%, sadat cDNA koe detect HCC yn asymptomatyske HBsAg seropositive yndividuen.Yn 'e Yeo48-stúdzje waard in hege frekwinsje (92.5%) fan hypermethylaasje fan' e RASSF1A-promotor fûn yn pasjinten mei HCC.Derneist, Xu et al.in diagnostysk model makke om HCC te foarsizzen mei in paniel fan spesifike methylaasjemarkers mei in spesifisiteit en gefoelichheid fan respektivelik 90.5% en 83.3%.It paniel lit pasjinten mei HCC ûnderskiede fan pasjinten mei oare leversykten, wat better is as AFP.Se fûnen ek dat normale kontrôles dy't posityf testen risikofaktoaren hawwe kinne foar HCC, lykas HBV-ynfeksje of in skiednis fan alkoholgebrûk.25 Wy hypoteze dat faktoaren mei hege risiko's foar HCC hypermethylaasje fan cfDNA befoarderje kinne, dy't dan bydraacht oan 'e foarútgong fan HCC, en sadwaande kin cfDNA in wichtige rol spylje yn screening foar groepen mei hege risiko's.Cai et al.gearfetsje it folsleine oanbod fan ctDNA-mutaasjes en biede in robúste strategy foar it beoardieljen fan tumorbelêsting by pasjinten.49 Dizze strategy kin tumorigenesis identifisearje in mediaan fan 4.6 moannen foar ôfbyldingsferoaring en hat superieure diagnostyske prestaasjes sjen litten yn ferliking mei serumbiomarkers AFP, AFP-L3, en PIVKA-II.De diagnostyske wearde fan cDNA-testen is oantoand as ôfbylding evaluaasje net beskikber is, dus cDNA-testen is fan wearde yn 'e diagnoaze fan iere HCC yn groepen mei hege risiko.Koartlyn brûkten wittenskippers NGS-technology om yndikatoaren te analysearjen fan multivariate genetyske fariaasje (ynklusyf 5-hydroxymethylcytosine, 5'-motyf, fragmintaasje, nucleosome trace, HIFI) yn 3204 klinyske samples en cfDNA.50 Re-validearre HIFI-modellen mei trije ûnôfhinklike trein-, test- en testsets lieten stabile en betroubere diskriminaasje sjen tusken HCC- en net-HCC-populaasjes mei respektivelik 95.79% en 95.42% gefoelichheid yn HCC-spesifike test- en testsets.De seksen wiene respektivelik 95,00% en 97,83%.De diagnostyske wearde fan 'e HIFI-metoade is heger as dy fan AFP by it ûnderskieden fan HCC fan cirrhosis.Derneist wurdt ctDNA ek brûkt yn sjirurgyske behanneling.Atsushi et al.bepale de preoperative serumnivo's fan ctDNA yn pasjinten mei HCC en fûn dat de werhellingsrate en de ekstrahepatyske metastasiskoers yn 'e cDNA-positive groep signifikant heger wiene as yn' e cDNA-negative groep, en cDNA-nivo's wiene signifikant korrelearre.mei tumorprogression.51 As in heul gefoelige biomarker, kin ctDNA it fermogen fan HCC foarsizze om skippen yn te fallen.Wang et al.útfierd hiele genome sequencing fan 46 pasjinten mei HCC, en multivariate analyze die bliken dat de drompel wearde fan de allele frekwinsje fan de cDNA fariant foar ynvaazje yn microvessels is 0,83%, gefoelichheid 89,7% en spesifisiteit 80,0%.in ûnôfhinklike risikofaktor foar mikrovaskulêre ynvaazje yn resectable HCC, wat suggerearret dat cDNA kin helpe om optimale behanneling te lieden.Ta beslút, ctDNA is folslein belutsen by it foarkommen en ûntwikkeling fan HCC en kin brûkt wurde foar iere screening, sjirurgyske evaluaasje en syktemonitoring.
CTC's binne maligne sellen ôflaat fan primêre tumors of metastasen dy't metastasearje nei de bloedstream.Tumorsellen secrete matrix metalloproteinases (MMP's), dy't de keldermembraan ôfbrekke, wêrtroch tumorsellen direkt yn 'e bloed- en lymfefetten kinne komme.De measte CTC's wurde lykwols rap elimineare troch anoikis, ymmúnoanfal, of skearstress.53 De epitheliale-mesenchymale oergong (EMT) lit CTC's maklik isolearje fan it primêre tumorweefsel, kapillaren ynfalle en signifikant ferbettere oerlibjen, metastasis, invasiviteit en medisynferset krije.Stúdzjes hawwe oantoand dat d'r djippe heterogeniteit is tusken de ferskate tumorsellen yn primêre metastatyske tumors.Sa kin CTC-analyze liede ta in wiidweidich begryp fan tumorselheterogeniteit.54
Spesifike markers foar HCC-assosjearre CTC's omfetsje glypican-3 (GPC3), asialoglycoprotein receptor (ASGPR), epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) en stamzell-assosjearre markers lykas CD44, CD90, 55 en intercellular adhesion molecule 1 (ICAM1).).57 Ekspresje fan GPC3 is faker yn HCC tumorsellen mei tuskenlizzende en lege differinsjaasje en befoarderet ekstrahepatyske migraasje;Dêrneist, de oanwêzigens fan GPC3 + ​​CTCs jout metastatic HCC.58 ASGPR is in transmembranprotein allinich útdrukt op it oerflak fan hepatocytes en wurdt tige útdrukt yn goed differinsjearre HCC.EpCAM is ien fan 'e meast brûkte membraan-assosjearre proteïnen om CTC's te fangen.EpCAM is identifisearre as in oerflakmarker fan HCC-sellen mei stamselkenmerken,59 dy't korrelearret mei ferskate klinyske patologyske funksjes fan HCC, lykas vaskulêre ynvaazje, beoardiele AFP-nivo's, en avansearre poadium fan leverkanker yn it Barcelona Sikehûs (BCLC).It 60 CTC EMT-fenotype is tige metastatysk.54 EMT-prosessen yn 'e CTC befoarderje HCC-metastasis.Ekspresje fan EMT-markers lykas vimentin, twist, E-box sinkfinger binding (ZEB) 1, ZEB2, snail, slug, en E-cadherin binne studearre yn lever-ôflaat CTC's fan HCC-pasjinten.58 It CanPatrol™-systeem ûntwikkele troch Cheng [61] klassifisearre CTC's yn trije fenotypyske subgroepen basearre op foaral útdrukte markers: epitheliale fenotype (EpCAM, CK8/18/19), mesenchymal fenotype (vimentin, spiraal), en mingd fenotype.Yn 176 pasjinten wie totale CTC superieur oan AFP by it ûnderskieden fan HCC fan benigne leversykte.De AUC-wearden foar totale CTC, AFP, en kombineare totale CTC en AFP wiene 0.774 (95% CI, 0.704–0.834), 0.669 (95% CI, 0.587–0.750), en 0.821 (95% CI, 0.756–0.856–0. ).), respektivelik.CTC-klassifikaasje basearre op EMT kin HCC-diagnoaze, iere weromkomst, metastasis en koartere totale tiid foarsizze.
Op it stuit omfetsje metoaden foar it opspoaren fan CSC's fysike metoaden en biologyske metoaden.Fysike metoaden, faak oantsjutten as ferriking basearre op biofysyske eigenskippen, binne benammen ôfhinklik fan 'e fysike eigenskippen fan 'e CSC, lykas grutte, tichtens, lading, mobiliteit en ferfoarming.Ofhinklik fan 'e fysike eigenskippen binne d'r ferskate metoaden lykas filtraasje-basearre systemen, dielektrophoresis, ensfh. Dy lêste, ek wol bekend as immunoaffinity-basearre ferriking, is benammen basearre op antigeen-antistof-bining, om't de metoade antykladen brûkt tsjin tumorspesifike biomarkers lykas EpCAM, ASGPR, minsklike epidermale groeifaktorreceptor 2 (HER2), prostaatspesifike antigeen (PSA), minsklike pancytokeratin (P-CK) en carbamoylfosfaatsyntase 1 (CPS1).62 In oar type, de no-ferrikingsmetoade neamd, brûkt flowcytometry om CTC's te ûnderskieden fan leukozyten basearre op in hegere nukleêre-to-cytoplasmyske ferhâlding en grutte.Op it stuit is de ienige FDA-goedkarde test foar it opspoaren fan CTC's it Cell-Search ™ systeem, dat de EpCAM-sel oerflakmarker brûkt. Lykwols, kombinearre markers-basearre CTC detection koe fergrutsje de positivity rate.54 In mingsel fan antistoffen tsjin ASGPR en CPS1 berikte in CTC detection rate fan 91% yn HCC pasjinten.63 Zhang et al brûkt in CTC-Chip mei antistoffen tsjin ASGPR, P -CK en CPS1, en differinsjearre HCC-pasjinten fan dyjingen mei goedaardige leversykte of net-HCC-kanker mei in taryf fan 100%.64 In stúdzje troch Wang ûntdekte EpCAM + CTC's yn 60% fan 42 HCC-pasjinten en fûn signifikante korrelaasjes tusken sawol de positiviteit taryf en it oantal CTC's mei TNM-stadium.65 Guo et al fûnen dat in CTC-ôflaat PCR-score ferhege waard yn 125/171 (73%) pasjinten waans AFP-nivo <20 ng/mL wie mei in gefoelichheid fan 72.5% en in spesifisiteit fan 95.0%, fergelike mei 57.0% en 90.0% foar AFP by in cutoff 20 ng / ml.66 De kombinaasje fan AFP en CTCs kin ferbetterje HCC detection.45 It wurdt leaud dat CTCs hawwe in foardiel boppe AFP yn iere screening fan groepen mei hege risiko foar HCC. Lykwols, kombinearre markers-basearre CTC detection koe fergrutsje de positivity rate.54 In mingsel fan antistoffen tsjin ASGPR en CPS1 berikte in CTC detection rate fan 91% yn HCC pasjinten.63 Zhang et al brûkt in CTC-Chip mei antistoffen tsjin ASGPR, P -CK en CPS1, en differinsjearre HCC-pasjinten fan dyjingen mei goedaardige leversykte of net-HCC-kanker mei in taryf fan 100%.64 In stúdzje troch Wang ûntdekte EpCAM + CTC's yn 60% fan 42 HCC-pasjinten en fûn signifikante korrelaasjes tusken sawol de positiviteit taryf en it oantal CTC's mei TNM-stadium.65 Guo et al fûnen dat in CTC-ôflaat PCR-score ferhege waard yn 125/171 (73%) pasjinten waans AFP-nivo <20 ng/mL wie mei in gefoelichheid fan 72.5% en in spesifisiteit fan 95.0%, fergelike mei 57.0% en 90.0% foar AFP by in cutoff 20 ng / ml.66 De kombinaasje fan AFP en CTCs kin ferbetterje HCC detection.45 It wurdt leaud dat CTCs hawwe in foardiel boppe AFP yn iere screening fan groepen op hege risiko foar HCC.Marker-basearre kombineare deteksje fan CTC's kin lykwols it persintaazje positive resultaten ferheegje.54 In mingsel fan anty-ASGPR en CPS1-antylders berikte in CTC-deteksjerate fan 91% yn pasjinten mei HCC.63 Zhang et al.brûkte in CTC-Chip mei antykladen tsjin ASGPR, P-CK en CPS1, en ûnderskiede ek pasjinten mei HCC fan dyjingen mei goedaardige leversykte of net-HCC mei in taryf fan 100%.частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скрининге групп. frekwinsje en oantal CTC's mei TNM-stadium.65 Guo et al fûnen dat de PCR ôflaat fan CTC's ferhege waard yn 125/171 (73%) pasjinten dy't AFP-nivo's <20 ng/mL hiene mei in gefoelichheid fan 72.5% en in spesifisiteit fan 95.0% yn ferliking mei 57.0% en 90.0% foar AFP op in cut-off nivo fan 20 ng/mL.66 De kombinaasje fan AFP en CTC's kin de deteksje fan HCC's ferbetterje.45 CTC's wurde beskôge as in foardiel boppe AFP yn iere screening groepen.mei in heech risiko fan HCC.Marker-basearre kombineare deteksje fan CTC's kin lykwols it persintaazje positive resultaten ferheegje.54 In mingsel fan anty-ASGPR en CPS1 antykladen berikte in 91% CTC-deteksjerate yn pasjinten mei HCC.63 Zhang et al.brûkte CTC-chips mei antykladen tsjin ASGPR, P-CK en CPS1 en ûnderskate pasjinten mei HCC fan goedaardige leversykte en net-HCC mei 100%.64 Wang's stúdzje identifisearre 60% fan EpCAM + CTC's yn 42 HCC-pasjinten en fûn in signifikante korrelaasje tusken ynsidinsje en oantal CTC's op it TNM-stadium. 65 Guo 等 等 等 等 等 等 等 等 等 等 等 在 在 在 AFP 水平 <20 ng / ml 的 125/171 (73%, CTC 衍生 的 PCR 评分 升高, 敏感性 为 72,5%, 特异性 为 95.0%, 而 AFP 在值为20 ng/mL 时的特异性为为57.0% 和90.0%. 65 Guo 等 等 等 等 等 在 在 在 在 在 在 在 <20 ng / ml 的 125/171 (73%) 名名 ,,, 为 衍生, 评分, 敏感性 为为 72,5%, 为 95.0%, afp 在 截止 截止 截止 截止 截止 截止截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 为 20ng / ML 时 的 特异性 为 57.0% 和 90.0%.65 Guo et al.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки Специфичность составляла 20 нг/ml. fûn dat yn 125/171 (73%) pasjinten mei AFP-nivo's <20 ng/mL, CTC-ôflaat PCR-wearden waarden ferhege mei in gefoelichheid fan 72.5% en in spesifisiteit fan 95.0%, wylst AFP wie by cut-off spesifisiteit wie 20 ng/ml.ml wie 57,0% en 90,0%.66 De kombinaasje fan ORP en CTC ferbettert de deteksje fan HCC.45 CTC's wurde nei alle gedachten superieur oan AFP yn iere screening fan hege risiko HCC-populaasjes.Sa, foar CTC-positive en hege-risiko HCC-groepen, CTC-testen moatte routine wurde kombinearre mei echografie en AFP-deteksje.CTC's wurde lykwols beskôge as wichtige foarsizzers fan tumormetastasis en weromkomst, en deteksje fan CTC's wurdt net selsstannich oanrikkemandearre as in diagnostysk ark.62 Dêrom kin CTC as in bettere foarsizzende biomarker tsjinje as oare op it stuit brûkte markers. Zhou et al fûnen dat pasjinten mei ferhege oantallen EpCAM+ CTC's en reguliere T-sellen in hegere risiko toande op it ûntwikkeljen fan HCC-werhelling, dan dy mei lege oantallen CTC's, mei in werhellingsferhâlding fan 66.7% tsjin 10.3% (P <0.001).67. In soartgelikense stúdzje waard rapportearre troch Zhong et al.68 Dêrnjonken fûn Qi dat 101 fan 112 pasjinten (90,81%) mei HCC, ynklusyf dy mei sykte yn 'e iere stage, posityf wiene foar CTC's en dat heul lytse HCC-nodules waarden ûntdutsen nei 3 oant 5 moannen fan follow-up. Zhou et al fûnen dat pasjinten mei ferhege oantallen EpCAM+ CTC's en regulearjende T-sellen in hegere risiko toande op it ûntwikkeljen fan HCC-werhelling dan dy mei lege oantallen CTC's, mei in werhellingsferhâlding fan 66.7% tsjin 10.3% (P <0.001).67 A. ferlykbere stúdzje waard rapportearre troch Zhong et al.68 Dêrnjonken fûn Qi dat 101 fan 112 pasjinten (90,81%) mei HCC, ynklusyf dy mei sykte yn 'e iere stadium, posityf wiene foar CTC's en dat heul lytse HCC-nodules waarden ûntdutsen nei 3 oant 5 moannen fan follow-up. Чжоу и др.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. Zhou et al fûnen dat pasjinten mei ferhege EpCAM+ CTC's en reguliere T-sellen in hegere risiko fan HCC-werhelling hienen as dy mei lege CTC's, mei in weromkomstfrekwinsje fan 66.7% tsjin 10.3% (P<0.001)67.In ferlykbere stúdzje waard útfierd troch Zhong et al.68. Dêrnjonken fûn Qi dat 101 fan 112 pasjinten (90.81%) mei HCC, ynklusyf dy mei frjemde sykte, CTC's hienen, en dat heul lytse HCC-nodules waarden ûntdutsen nei 3 oant 5 moannen fan follow-up. Zhou 等 人 发现, 与 CTC 数量 较 少 的 数量 相比, EPCAME + CTC 和 调节性 调节性 调节性 升高 的 患者 数量 数量 更 高, 复发率 的 风险 更 66,7% 和 10,3% (P <0,001). Zhou 等 人 发现 与 与 CTC 数量 少 的 患者 相比, EPCAME + CTC 和 T 细胞 数量 的 患者 发生 Hcc 复发 风险 更 为 为 复发率 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为. p <0.001) 。。。。... Чжоу и др.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). Zhou et al.fûn dat pasjinten mei ferhege EpCAM + CTC's en regeljende T-sellen in hegere risiko fan HCC-werhelling hienen yn ferliking mei pasjinten mei minder CTC's, mei weromkomstraten fan respektivelik 66.7% en 10.3% (P <0.001).In ferlykbere stúdzje waard rapportearre troch Zhong et al.68 Dêrnjonken fûn Qi dat 101 fan 112 HCC-pasjinten (90.81%), ynklusyf pasjinten mei iere sykte, positive CTC-resultaten hienen en tige lytse HCC-nodules fûnen nei 3 besites.Observaasje oant 5 moannen.Se fûnen ek CTC's yn 12 pasjinten mei chronike HBV-ynfeksje en fûnen lytse HCC-tumors binnen 5 moannen yn 2 CTC-positive pasjinten.69 Sa kinne CTC's brûkt wurde om HCC te foarsizzen, 70 mar se kinne mear routine brûkt wurde as foarsizzende biomarkers.
Lykas cfDNA, wurdt cfRNA frijlitten yn 'e bloedstream fia ferskate systemen.Dizze molekulen yn it perifeare bloed fertsjintwurdigje it kankerweefsel fan komôf.Yn ferliking mei markers ûntdutsen troch net-invasive metoaden, binne cfRNA's dynamysk regele, weefselspesifyk en oerfloedich yn 'e ekstrazellulêre omjouwing.De betsjutting en diagnostyske wearde fan 71 miRNAs (miRNAs) yn HCC is rapportearre yn in protte stúdzjes.miRNA's binne endogene net-kodearjende RNA's (ncRNA's) dy't ferskate molekulêre biologyske aktiviteiten regelje troch de oersetting fan doelmessenger-RNA's (mRNA's) te remmen.miRNAs lizze yn apoptotyske lichems ynkapsele yn exosomen, mar se kinne ek stabyl bine oan serumproteinen en lipiden yn perifeare bloed en kinne brûkt wurde om HCC te evaluearjen.microRNAs binne belutsen by leverregeneraasje, lipidemetabolisme, apoptose, ûntstekking, en de ûntwikkeling fan HCC.72 Onkogene miRNA's lykas miR-21, miR-155 en miR-221 binne goed bekend yn HCC.Benammen miR-21 spilet in wichtige rol yn kollagensynteze yn 'e ekstrazellulêre matrix en fibrosis en befoarderet hepatocarcinogenesis troch aktivearjen fan hematopoietyske stamsellen.72,73 Tumor-suppressor miRNA's yn HCC omfetsje miRNA-122, miRNA-29, de Let-7-famylje, en de miRNA-15-famylje.De famylje Let-7 bestiet út in protte tumor suppressor miRNA's dy't de RAS-famylje rjochtsje.De miR-15-famylje omfettet miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195, en miR-497, dy't komplementêre sekwinsjes hawwe foar bepaalde mRNA's.Derneist binne lange net-kodearjende RNA's (lncRNA's) en sirkulêre RNA's (cirRNA's) ek wichtich foar iere screening fan HCC.lncRNA's fertsjintwurdigje de breedste klasse fan ncRNA's, ynklusyf mRNA-like ncRNA's, en binne belutsen by de patogenese fan in protte minsklike sykten.LncRNA's spylje in regeljende rol yn 'e levermikroomjouwing en chronike leversykte.74 CircRNA's binne ek in klasse fan ncRNA's mei meardere funksjes yn 'e regeling fan geneekspresje.Koartlyn binne circRNA's beskôge as diagnostyske ark foar HCC.
Circulating frije RNA hat opmerklike stabiliteit, ynklusyf wjerstân tsjin temperatuer, pH, en RNase, dy't makket it isolemint fan fnRNA út perifeare bloed minder ferfeelsum mei help fan standert RNA suvering metoaden.De meast brûkte metoaden befetsje NGS, microarray en RT-qPCR.NGS lit mikroRNA's yn it heule genome mjitten wurde.Dizze metoade is lykwols djoer en de analyze is net standerdisearre.Yn tsjinstelling, RT-qPCR is goedkeap, rap fersterket nucleic soeren, en biedt in protte foardielen lykas hegere gefoelichheid, hegere krektens, breder dynamysk berik, en easkjen minder samples.Mikroarrays binne in oare metoade dy't brûkt wurdt foar miRNA-deteksje basearre op gefoelige en spesifike hybridisaasje fan doelmiRNA's mei komplementêre DNA-probes, 75 mar analyse fan mikroarraygegevens is tiidslinend.
Sirkulearjende miR-122 en Let-7 binne rapportearre om potinsjeel nuttich te wêzen by diagnoaze fan iere stadium HCC yn groepen mei hege risiko, markers yn pasjinten mei HBV-assosjearre premalignante nodules en iere stadium HCC.76 Cai et al.fûn dat leden fan 'e Let-7-famylje (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126, en miR-199a/b) it risiko hawwe fan chronike HCC yn pasjinten mei hepatitis.De famylje Let-7 kin tsjinje as in effektive surrogaat biomarker foar it foarsizzen fan 'e ûntwikkeling fan HCC yn groepen mei hege risiko's ferbûn mei chronike hepatitis C. 77 miR-122 hat in hege diagnostyske krektens by it opspoaren fan iere HCC yn pasjinten mei levercirrhosis.78 Serum sirkulearjend MiR-107 is ek evaluearre yn 'e iere stadia fan HCC, 79 en hat sjen litten goede mooglikheden yn hege-risiko populaasjes.Zhou et al rapporteare dat in paniel fan miRNA's (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a en miR-801) HCC ûnderskiede kin fan chronike hepatitis B (CHB) en cirrhosis gefoelichheid wie 79,1% en 75%, en spesifisiteit 76,4% en 91,1%, respektivelik.80 Yn HBV-relatearre HCC fûnen wy dat miR150-nivo's signifikant fermindere waarden yn ferliking mei dy yn chronike HBV-pasjinten sûnder HCC (sensitiviteit 79,1%, spesifisiteit 76,5%).-224 waard ferhege yn HCC yn ferliking mei sûne kontrôles, en subgroepanalyses lieten hegere nivo's sjen yn pasjinten mei HCC ferbûn mei HBV.hepatitis B-assosjearre cirrhosis en HCC-pasjinten identifisearre in siRNA-klassifisearre mei sân differinsjaal útdrukte siRNA's dy't HCC yn ferskate kontrôles kinne detectearje;AUC-berik by betide screening is better dan AFP-frijwilligers.Se fûnen dat fjouwer miRNA's (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p, en miR-365a-3p) pasjinten mei HCC kinne ûnderskiede fan pasjinten sûnder HCC.Fiif oerekspresje miRNA's (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p, en miR-148a-3p) wurde beskôge as potinsjele HBV-ynfeksjes yn HCC, cirrhosis, en CHB-biomarkers, benammen miR-34a-5p kin biomarkers wêze foar levercirrhosis,85 en kinne potinsjele biomarkers wêze foar iere screening fan HCC yn populaasjes mei hege risiko.De meast studearre lncRNA yn HCC is tige aktivearre yn leverkanker (HULC).Oare stúdzjes hawwe oantoand dat HULC sirkulearje yn HCC-pasjinten kin wurde brûkt as diagnostyske marker, om't dit lncRNA tige upregulearre is yn HCC-pasjinten yn ferliking mei sûne yndividuen.71,86 Under oare lnRNA's wurdt LINC00152 beskôge as de bêste diagnostyske lncRNA troch syn hege AUC, gefoelichheid en spesifisiteit.86 Yn ien stúdzje fergrutte perifeare bloedekspresje fan LINC00152 stadichoan fan normale sûne kontrôles nei pasjinten mei CHB en cirrhosis, en wie úteinlik it heechste yn HCC.Stúdzjes fan 'e ekspresje fan circSMARCA5 yn it plasma fan pasjinten mei HCC hawwe in progressive delgong yn' e ekspresje yn HCC toand, fariearjend fan hepatitis oant cirrhosis en precancerous lesions.87 Analyse fan ROC-kurven befêstige it potensjeel fan dizze circRNA's yn it ûnderskieden fan pasjinten mei hepatitis of levercirrhosis fan dyjingen mei HCC, benammen dy mei AFP-nivo's ûnder 200 ng / ml.Dêrnjonken analysearre Zhu 13.617 cyclyske RNA's yn plasma-samples fan HBV-assosjearre HCC-pasjinten en befêstige dat 6 cyclyske RNA's oars útdrukt waarden yn HCC en HBV-assosjearre cirrhosis, wat suggerearret dat cRNA's foardielich wêze kinne.markers foar iere screening fan groepen mei hege risiko's lykas dyjingen dy't ferbûn binne mei leversykte, sklerosepasjinten.88
Eksosomen binne membraanblaasjes mei in diameter fan 40-160 nm;meardere intracellular vesicles fusearje mei de sel membraan en wurde frijlitten yn de ekstracellular matrix.Se befetsje in protte aktive komponinten, ynklusyf lipiden, aaiwiten, RNA en DNA, en spylje in wichtige rol yn kommunikaasje tusken sellen, sawol HCC as net-HCC sellen.89,90 Exosomes regelje de foarútgong fan HCC troch it aktivearjen fan hepatocyte fibroblasten en stellate sellen, immune sellen, normale hepatocytes, en HCC sellen.91 Yn 'e tumormikro-omjouwing produsearje tumorsellen in grut oantal eksosomen dy't wurde droegen fan kankersellen nei ûnrypke sellen, dy't op har beurt belutsen binne by onkogenese, degradaasje en sellulêre sinjalearring.92 Stúdzjes hawwe oantoand dat eksosomen onkogenen kinne oerdrage oan normale sellen tidens patologyske prosessen, wat ien fan 'e meganismen kin wêze fan tumorynvaazje en metastasis.93 De rol fan exosomes yn kankerprogression kin dynamysk en spesifyk wêze foar kankertype, 89 Exosomes kinne ynternalisearre wurde troch neistlizzende of fiere sellen om meardere doelgenen te regulearjen yn ûntfangersellen dy't belutsen kinne wêze by ynterzellulêre kommunikaasje-ionen en sellulêre mikro-omjouwing-ynteraksjes, se kinne bemiddelje sellulêre sinjalearring en metabolisme.94 Skaaimerken en dynamyske feroaringen fan exosome lading molekulen direkt wjerspegelje de skaaimerken en dynamyske feroarings fan âlderlike tumor sellen, 95 dat is ek de basis foar it brûken fan exosomes yn de diagnoaze en prognoaze fan kanker, likegoed as foar it foarsizzen fan yndividuele reaksje op antykanker terapy ..96
Tradysjonele laboratoariummetoaden foar isolearjen en analysearjen fan exosomen binne kompleks, mearstaps en tiidslinend, ynklusyf ultrasentrifugering, filtraasje, grutte útslutingchromatografy, suvering fan immunoaffiniteit, Western blotting, enzyme-keppele immunosorbent-assay (ELISA), PCR, en streamanalyse.miniaturisearre systemen en lab-on-a-chip platfoarms mei help fan mikro / nanotechnology wurde breed ûntwikkele foar flugge, handige in situ isolaasje fan exosomes.Nanoparticle tracking analyze (NTA) is in breed brûkte metoade foar it karakterisearjen fan de grutte en konsintraasje fan exosomen, ynklusyf metoaden lykas magnetyske nanopartikels en polyhydroxyalkanoaten.Mikrofluidyske en elektrogemyske metoaden kinne ek rap eksosomen detektearje yn hege opbringsten.
Eksosomale proteïnen binne wichtige markers foar de diagnoaze fan HCC.Yn 'e Arbelaiz-stúdzje waard it nivo fan 98 RasGAP SH3-binende proteïne (G3BP) en polymere immunoglobulinreceptor (PIGR) signifikant ferhege yn HCC-ôflaat exosomen, en de putative kombineare effektiviteit fan 'e twa aaiwiten wie superior oan dy fan AFP.Izeren oerlêst is in wichtige faktor dy't bydraacht oan 'e ûntwikkeling fan HCC.Tseng rapportearre dat hepcidin in wichtige rol kin spylje yn ferset tsjin HCC.99 Exosomes ôflaat fan 'e sera fan HCC-pasjinten hienen in signifikant hegere kopy oantal hepcidin mRNA farianten as harren sûne tsjinhingers, suggerearret dat hepcidin kin in nije diagnostyske biomarker foar HCC.It 14-3-3ζ-proteïne yn eksosomen produsearre troch 100 HCC kin T-sel-aktivearring, proliferaasje en differinsjaasje ferminderje en kin T-seltransformaasje yn reguliere T-sellen inducearje, wat resulteart yn T-seldepletie.101 Dit wurdt stipe troch ferskate stúdzjes dy't ûndersiikje fan tumor-ûntdûking fan ymmúntafersjoch, 102 dy't bydrage kinne oan HCC-tumorigenesis.
Neist de oanwêzigens fan ecRNA yn plasma of serum, kinne RNA-ferrike exosomen brûkt wurde foar net-invasive real-time staging yn iere tumorscreening en om tumorevolúsje en antwurd op terapy te bepalen.It nivo fan exosomal miRNA-21 yn it bloedserum yn 'e HCC-groep wie 2.21 kear heger as yn' e CHB-groep, en yn 'e HCC-groep wie it 5.57 kear heger as yn 'e sûne befolking.Yn 'e Wang-stúdzje fergrutte exosomen HCC signifikant yn fergeliking mei cirrhotyske pasjinten mei AUC-wearden fan 0.83 (95% CI 0.74-0.93) en 0.94 (95% CI 0.88-1.00).104 De krigen gegevens ferklearje de belutsenens fan spesifike exosomale ladingmolekulen yn 'e regeling fan onkogenesis en HCC-progression.105 Serum-ekspresje fan miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 en miR-26a is konsekwint.en metastasis, en miR21-nivo's wiene folle heger yn HCC-pasjinten as yn sûne kontrôles en ek yn CHB-pasjinten.102 LncRNA hie potinsjele diagnostyske wearde yn HCC.Stúdzjes hawwe oantoand dat eksosomen ôflaat fan 'e sera fan HCC-pasjinten signifikant hegere nivo's fan LINC00161, LINC000635, en lncRNA hawwe aktivearre troch transformaasje fan groeifaktor-β dan yn pasjinten sûnder HCC, en dizze lncRNA's binne sterk ferbûn mei TNM-poadium en tumorvolumint.110 Conigliaro et al.CD90+-eksosomen waarden fûn om hege nivo's fan lncRNAH19 út te drukken, wat de frijlitting fan vascular endothelial growth factor (VEGF) signifikant ferhege en VEGF-R1-receptorproduksje, wêrtroch angiogenesis stimulearre.93 CircRNA's binne in oar soarte fan exosomal ncRNA's - útdrukt op legere, mar stabile nivo's oer soarten, circRNA's toane ek spesifisiteit foar seltype, weefseltype, ûntwikkelingsstadium en regeljende aktiviteit.111 circRNAs binne diagnostyske biomarkers foar iere en minimaal invasive kanker.112 Resinte klinyske triennen hawwe oantoand dat de spesifisiteit fan yndividuele miRNA's yn it foarsizzen fan HCC net ideaal is.Dêrom kin komplekse deteksje mei meardere assays (bgl. miR-122 en miR-48a yn kombinaasje mei AFP) de identifikaasje fan iere HCC en de differinsjaasje fan HCC fan cirrhosis ferbetterje.100
Pasjinten mei CHB en levercirrhosis binne de meast foarkommende groep mei hege risiko foar it ûntwikkeljen fan HCC.Foar groepen mei hege risiko's, ienris in oanhâldende virologyske reaksje is berikt, moat in kosten-effektive tafersjochstrategy basearre op HCC-risiko wurde ûntwikkele, en iere screening is de kaai foar it ferbetterjen fan de diagnoaze en behanneling fan HCC mei in hege kosten-effektiviteitsferhâlding2 ..Iere screeningmetoaden foar kanker hawwe in protte beheiningen: effektive metoaden foar betide screening binne net ûntwikkele foar de measte soarten kanker, en adherinsje is normaal leech.Yn ferliking mei tradisjonele iere screeningmetoaden hat floeibere biopsie-technology foar de hân lizzende foardielen: gemak fan sampling, panrac-deteksje, goede sample-reprodusearberens, en effektive reaksje op tumorheterogeniteit.Sjoen de kosten-effektiviteit fan 'e metoaden dy't ferbûn binne mei floeibere biopsie, is har gebrûk yn HCC-screening net regelmjittich hifke.Nettsjinsteande foarútgong yn krekte deteksje op molekulêr nivo, is floeibere biopsie kostber om HCC te detektearjen yn doelpasjinten, wat it wiidferspraat gebrûk beheine yn ferliking mei spesifike imagingprosedueres lykas ultrasound en magnetyske resonânsjeôfbylding.113,114 In eardere stúdzje liet lykwols sjen dat floeibere biopsie in signifikant foardiel toande yn termen fan kwaliteit-oanpast libbensjierren (QALY's).115 De foardielen fan floeibere biopsie yn iere karsinoom fan 'e mage en nasopharynx binne ek toand.116,117 De hjoeddeistige werjefte is dat floeibere biopsie serumbiomarkers en radiologyske screening oanfolje kin by it opspoaren en diagnoaze fan tumors.117 118
Neffens aktuele literatuer hat floeistofbiopsytechnology in signifikant hegere gefoelichheid en spesifisiteit sjen litten yn iere screening fan groepen mei hege risiko foar leverkanker.Nettsjinsteande it type floeistofbiopsy kin it HCC ûnderskiede fan persoanen mei hege risiko sûnder HCC, wat suggerearret it belang fan iere screening, om't ferskillen tusken heech-risiko en sûne persoanen evident binne.ctDNA hat in koarte heale libben en kin brûkt wurde om HCC te detektearjen, sadat alle feroaringen yn tumor-ôflaat cDNA real-time konkreet bewiis kinne leverje fan tumorprogression, benammen foar lytse tumors.In heech nivo fan ctDNA jout de ûntwikkeling en fersprieding fan kanker oan en is in betide yndikator fan progression en weromkomst.Derneist kinne pasjinten, basearre op de resultaten fan ctDNA, yndividuele behanneling en follow-up krije.119 Spesifike methylaasjeplakken kinne in bettere marker wêze as AFP foar iere identifikaasje fan HCC en cirrhotyske nodules.Yn resectable gefallen fan HCC binne hege nivo's fan cDNA oantsjutting fan mikrovaskulêre ynvaazje en postoperative weromkomst en metastasis.Feroaringen yn kopynûmer binne ferbûn mei it oerlibjen fan pasjinten mei HCC.It kin oannommen wurde dat cDNA-evaluaasje kin belutsen wurde by de algemiene behanneling fan HCC, en cDNA kin tsjinje as in effektive yndikator fan therapeutyske modulaasje.Markers basearre op spesifike genetyske mutaasjes yn ctDNA binne oannommen troch klinyske rjochtlinen om effektiviteit te foarsizzen en medisynresistinsje te kontrolearjen.ctDNA-testen kin it meast brûkbere floeibere biopsie-ark wêze foar iere screening.CTC's spylje ek in wichtige rol yn 'e iere screening fan hege risiko HCC-groepen.Ferskate markers fan HCC-assosjearre CTC's binne fan bysûnder belang yn it begjin, ûntwikkeling en weromkomst fan HCC.As membraanvesikels binne eksosomen belutsen by ynterzellulêre kommunikaasje, benammen yn HCC-sellen.Sirkulearjende mikroRNA's binne stabyl yn it bloed en kinne dus brûkber wêze foar iere screening fan HCC.Stadichoan waarden eksosomale aaiwiten en RNA-rike eksosomen ûntdutsen, en har foarsizzende effektiviteit foar HCC waard befêstige.Ynteressant kinne ferskate etiologyen fan HCC ek wurde assosjeare mei ferskate mutaasjes, sadat wy ferskate biomarkers kinne selektearje foar iere screening basearre op ferskate etiologyen fan HCC.120
De hjoeddeistige floeistofbiopsytechniken binne lykwols twifelich yn termen fan stabiliteit en kinne net selsstannich iere screening of monitoring fan HCC útfiere, mar kinne noch altyd yndividuele screening en diagnoaze oanfolje.121 As in foarm fan floeibere biopsie hawwe de deteksje en ôfbylding fan ctDNA, CTC, cfRNA en exosome-assosjearre AFP of PIVKA-II kânsrike tapassingen yn 'e iere diagnoaze en prognoaze fan HCC.It krekte meganisme fan frijlitting fan ctDNA yn it bloed bliuwt lykwols te ferklearjen.It iepenbierjen fan de basale biologyske eigenskippen fan ctDNA kin it gebrûk as marker makliker meitsje.De lytse hoemannichte ctDNA yn 'e sirkulaasje en strikte easken foar samplebehanneling binne útdagings foar de klinyske ymplemintaasje fan cDNA-deteksje yn HCC.Derneist hawwe genetyske mutaasjes gjin spesifike skaaimerken dy't krekte identifikaasje fan karzinogenen mooglik meitsje.Om't meardere genetyske en somatyske farianten ek oanwêzich binne yn normale weefsels, kinne genetyske mutaasjes identifisearre troch floeistofbiopsy fan beheind nut wêze yn iere screening foar HCC.122 De beheiningen fan goed definieare nuttige gen-doelen en biomarkers dy't helpe om cDNA te ûnderskieden fan net-tumor-DNA binne de wichtichste problemen yn it gebrûk fan cDNA.gebrek oan brûkberens fan gefoelige en spesifike markers foar it opspoaren fan CTC's.Allinich libbensfetbere sellen mei metastatysk potinsjeel waarden fûn, en de optimale kombinaasje fan CSC-ferrike markers wie ûndúdlik.Isolaasje fan CTC's foar kultuer en evaluaasje fan har mutaasjeprofilen is ek in útdaagjende taak.Troch problemen mei de identifikaasje, isolaasje en suvering fan exosomes, is it spesifike molekulêre meganisme noch ûndúdlik, en eardere stúdzjes oer it meganisme fan exosomes en HCC binne net yn djipte west, en de manier wêrop miRNAs, lncRNAs, en aaiwiten wurde sorteare yn exosomes , En it is net dúdlik oft exosome opname is in spesifyk type proses.It brûken fan exosomes foar de diagnoaze en behanneling fan HCC is noch yn it preklinyske stadium.It gebrek oan standerdisearring fan floeibere biopsieprosedueres, lykas it type buizen dat wurdt brûkt om bloed, bloedvolumint, monsteropslach en deteksje, isolaasje en ferriking te sammeljen, kin har gebrûk yn routine klinyske praktyk útslute fanwege ferskillen yn praktiken yn medyske sintra.De effektiviteit fan floeibere biopsie yn iere screening, diagnoaze, effektiviteit evaluaasje, en foarsizzing fan HCC bliuwt te ûndersiikjen, benammen foar groepen mei hege risiko.Flüssige biopsietechnology hat in grut potensjeel en wurdt ferwachte dat se yn 'e heine takomst in soad brûkt wurde yn' e klinyske praktyk fan leverkanker.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN skat ynfal en mortaliteit fan 36 soarten kanker yn 185 lannen.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660
2. Haadkantoar fan de Nasjonale Health Kommisje.Kritearia foar de diagnoaze en behanneling fan primêre leverkanker (2022-edysje) [J].Journal of Clinical Liver Diseases, 2022, 38 (2): 288-303.doi: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z, et al.Rjochtlinen foar de diagnoaze en behanneling fan hepatocellular carcinoma (2019 edysje).Kanker fan 'e lever.2020;9(6):682-720.doi: 10.1159/000509424
4. Kokudo N, Takemura N, Hasegawa K, et al.Clinical practice guidelines for hepatocellular carcinoma: Japanese Society for Liver Diseases, 2017 (JSH-HCC 4e rjochtlinen), 2019 update.Lever Disease Reservoir.2019;49(10):1109–1113.doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Liquid biopsy yn chronike leversykte.Ann Hepato.2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu., Tan P.Kh.Liquid breast cancer biopsy: in rjochte resinsje.Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.doi: 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Kanval F., Singal AG Surveillance foar hepatocellular carcinoma: aktuele bêste praktiken en takomstige rjochtingen.Gastroenterology.2019;157(1):54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. European Research Association L, Europeeske Organisaasje R, C Therapeutics.Klinyske rjochtlinen EASL-EORTC: behanneling fan hepatocellular karsinoom.J Heparin.2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G., Ha SA, Kim HK et al.Kombinearre analyze fan AFP en HCCR-1 as brûkbere serologyske markers yn lyts hepatocellular karzinom: in prospective kohortstúdzje.Dy Mark.2012;32(4):265–271.doi: 10.3233/DMA-2011-0878
10. Chen S, Chen H, Gao S, et al.Differinsjaal ekspresje fan plasma microRNA-125b yn hepatitis B-firus-assosjearre leversykte en diagnostysk potinsjeel fan hepatitis B-firus-induzearre hepatocellular carcinoma.Reservoir foar leversykte.2017;47(4):312-320.doi:10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. et al.Biology en betsjutting fan alfa-fetoprotein yn hepatocellular karsinoom.Lever int.2019;39(12):2214–2229.doi: 10.1111/liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N, et al.Klinyske rjochtlinen foar de behanneling fan hepatocellular carcinoma yn 'e regio Azië-Stille Oseaan: 2017 update.Ynternasjonale Organisaasje foar Leversykten.2017;11(4):317–370.doi: 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Xu Fei, Zhang Li, He Wei et al.Diagnostyske wearde fan serum PIVKA-II allinnich of yn kombinaasje mei AFP yn Sineeske pasjinten mei hepatocellular carcinoma.Dy Mark.2021;2021:8868370.doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. et al.Net-lytse sel longkanker net-plasma humorale floeistof biopsie: tichter by de tumor!sel.2020; 9(11).doi: 10.3390/sellen9112486
15. Mader S, Pantel K. Liquid biopsy: aktuele status en takomstperspektyf.Behanneling Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.doi: 10.1159/000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P, et al.Liquid-basearre kankerbiopsy: in multimodaal diagnostysk ark yn klinyske onkology.It bedriuw Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630.doi: 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Nucleic soeren yn minsklik plasma.CR Seances Soc Biol Fil.1948;142(3-4):241-243.
18. Mouliere F, Chandrananda D, Piskorz AM, et al.Avansearre deteksje fan sirkulearjend tumor DNA troch analyse fan fragmintgrutte.Wittenskip fertaalt medisinen.2018;10:466.doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. et al.Circulating tumor DNA fragmint lingte.PLOS genen.2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. Circulating tumor DNA: in promovende biomarker yn floeistof-basearre kankerbiopsy.doel tumor.2016;7(30):48832–48841.doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ et al.Deteksje fan sirkulearjend tumor DNA yn iere en lette stadia fan minsklike maligniteiten.Wittenskip fertaalt medisinen.2014;6(224):224ra24.doi: 10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Liquid biopsy foar mutasjonele foarsizzende analyze fan fêste kanker: in perspektyf fan in patolooch.J Biotechnology.2019;297:66-70.doi: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L, Tuveri S, Yatsenko T, et al.Iere tumordeteksje troch sirkulearjende plasma DNA-screening: hype of hope?Belgysk klinysk rjocht.2020;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Nishida N. Effekt fan hepatitisvirus en fergrizing op DNA-methylaasje yn minsklike hepatokarcinogenesis.Histopatology.2010;25(5):647–654.doi: 10.14670/HH-25.647